Akademik Veri Yönetim Sistemi
YEŞİLADA E. (Yürütücü)
Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2016 - 2019
Amaç: Meme tümörünün büyümesi ve metastazı anjiyogeneze bağlıdır. Kanser
tedavisinde tek bir anjiyogenik faktörün baskılanması, anjiyogenezin inhibisyonunda
yetersiz kalabilir. Aynı anda birden fazla geni hedefleyen birkaç shRNA’yı kodlayan
vektörlerin tasarımı, RNAi teknolojisi açısından önemli bir stratejidir. Birkaç shRNA’yı
hedefleyen vektör tek bir mRNA içerisinde bulunan birçok bölgeyi hedefleyebildiği gibi
farklı genlere hedeflenerek de daha etkin bir protein ifade baskılanması oluşturulabilir.
Bu çalışmada, anjiogenezde önemli rol oynayan VEGF-A ve VEGFR-2 genlerine
hedeflenen shRNA’ları içeren tek bir RNAi-temelli vektör modifikasyonu ile hücrelerde
RNAi etkisinin artırılması ve meme kanserinde terapötik etkinliğinin iyileştirilmesi
amaçlandı.
Materyal ve Metot: Çalışmamızda VEGF-A ve VEGFR-2’ye spesifik shRNA dizileri
tasarlandı ve her iki shRNA dizisi vektöre tek ve iki basamakta klonlandı ve kontrol
çalışmaları yapıldı. Ayrıca, tek bir vektöre her iki dizinin birlikte ve her bir dinini
vektöre ayrı ayrı klonlanmasında aynı metod kullanıldı. Tekli ve ikili olarak klonlanan
plazmidlerin gen susturma etkinlikleri meme kanser hücreleri olan MCF-7 ve MDAMB-231 hücrelerinde protein seviyesinde ELISA yöntemi ile incelendi.
Bulgular: Anjiogenezde önemli rol oynayan VEGF-A ve VEGFR-2’ye spesifik
dizilerin susturma vektörlerine klonlanması ile meme kanser hücrelerinde VEGF-A ve
VEGFR-2 protein ekspresyonları önemli ölçüde baskılanmıştır. Çalışmamızda ikili
klonlama yapılan vektörlerin tekli klonlama yapılan vektörlere göre meme kanseri
hücrelerinde gen susturma etkinliği daha yüksek bulundu.
Sonuç: Bu tez çalışması ile RNAi teknolojisi kullanılarak birden fazla anjiogenik
faktörün ya da protein ve ilişkili reseptörünün birlikte susturulması ile meme kanserinin
tedavisinde ümit verici sonuçlar elde edilebileceği önerilebilir.